鱼腥草芩蓝合剂为常见中药制剂，由鱼腥草、黄芩、板蓝根、连翘、金银花5味中药材配制而成，具有清热解毒的作用，临床常用于治疗外感风热引起的咽喉肿痛，急性咽炎、扁桃体炎等疾病。现行标准中只有鱼腥草、黄芩、连翘和金银花的薄层色谱鉴别项和黄芩苷含量的测定项，不能全面地反映复方制剂的内在质量。中国食品药品检定研究院昝珂等，建立了HPLC法同时测定鱼腥草芩蓝合剂中绿原酸、连翘酯苷A、黄芩苷、槲皮苷、汉黄芩苷、槲皮素和汉黄芩素7种成分含量的方法。

主要仪器与试剂

高效液相色谱仪：UltimateU型，配有Chromeleon7.2SR5色谱工作站、真空脱气机、自动进样器、柱温箱和二极管阵列检测器，赛默飞世尔科技（中国）有限公司。

电子天平：XPE型，感量为0.01mg，瑞士梅特勒–托利多公司。

超声波提取器：ELMASONICP型，德国艾尔玛公司。

纯水仪：MilliPAKadvantageA10型，美国密理博公司。

复方鱼腥草合剂样品：某生产企业样品。

绿原酸、连翘酯苷A、黄芩苷、槲皮苷、汉黄芩苷、槲皮素、汉黄芩素对照品：批号分别为、A、、、、、，纯度（质量分数）分别为96.1%、97.2%、93.3%、.0%、98.5%、98.8%、99.1%，成都普菲德生物技术有限公司。

乙腈、甲醇：均为色谱纯，美国赛默飞世尔公司。

磷酸，分析纯，国药集团化学试剂（北京）有限公司。

实验用水为超纯水。

仪器工作条件

色谱柱：SymmetryShieldRP18柱(4.6mm×mm，5μm，美国沃特世公司)；流动相：乙腈–0.1%甲酸溶液；洗脱方式：梯度洗脱；洗脱程序：初始乙腈体积分数为20%，0～30min，乙腈由20%逐渐增加至40%，保持30min，60～80min，乙腈由40%逐渐增加至80%；流量：1.0mL／min；检测波长：nm；柱温：30℃；进样体积：5μL。

溶剂配制

对照品单标储备液：分别精密称取绿原酸、连翘酯苷A、黄芩苷、槲皮苷、汉黄芩苷、槲皮素和汉黄芩素对照品各约10mg，其中黄芩苷置于10mL容量瓶中，其它6种化合物分别置于mL容量瓶中，各加入50%甲醇溶液溶解，稀释，定容至标线，配制成绿原酸、连翘酯苷A、黄芩苷、槲皮苷、汉黄芩苷、槲皮素和汉黄芩素的质量浓度分别为98.5、.4、、97.8、.2、98.8、.2μg／mL的单标储备液。

混合对照品溶液：分别精密量取上述对照品单标储备液各1mL，置于同一只10mL容量瓶中，加入50%甲醇溶液稀释并定容至标线，摇匀，配制成绿原酸、连翘酯苷A、黄芩苷、槲皮苷、汉黄芩苷、槲皮素、汉黄芩素的质量浓度分别为9.85、10.24、99.4、9.78、10.12、9.88、10.32μg／mL的混合对照品溶液。

样品处理

精密量取鱼腥草芩蓝合剂2mL，置于20mL棕色容量瓶中，加入50%甲醇溶液12mL，超声20min，冷却至室温，用50%甲醇溶液稀释至标线，摇匀，用0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液，待测。

测定结果

绿原酸、连翘酯苷A、黄芩苷、槲皮苷、汉黄芩苷、槲皮素和汉黄芩素在各自的质量浓度范围内与色谱峰面积线性关系良好，相关系数均大于0.，检出限为0.20～0.30μg／mL，定量限为0.60～1.00μg／mL。样品加标平均回收率为98.17%～.48%，测定结果的相对标准偏差为1.23%～1.76%（n=6）。

选自《化学分析计量》年第30卷第10期，详细内容